MANNITOL SALT PHENOL-RED AGAR (MERCK) | 1054040500

Mannitol salt phenol-red agar (1054040500) được sử dụng để xác định tụ cầu khuẩn Staphylococcus là một chủng vi khuẩn gây bệnh phổ biến trên người.

Staphylococcus xuất hiện trên da người nhưng trong điều kiện bình thường sẽ không gây bệnh. Chủng vi khuẩn này có khoảng 32 loài và bao gồm cả loài hiếu khí và kị khí tùy nghi. Chủng vi khuẩn phổ biến nhất là Staphylococcus aureus hay còn gọi tụ cầu vàng.

Có nhiều phương pháp và môi trường được sử dụng trong phân lập các loài Staphylococcus nhưng Mannitol salt phenol-red agar (1054040500) được sử dụng rất phổ biến. Môi trường này còn được gọi là môi trường Chapman. Khi cấy mẫu trong môi trường Mannitol salt phenol-red agar hầu hết các vi khuẩn sẽ bị ức chế bởi nồng độ muối cao ngoại trừ một số loài ưa nồng độ muối cao. Trong khi đó các loài staphylococcus đặc biệt là tụ khuẩn vàng sẽ phát triển và tạo thành các khuẩn lạc tròn, bờ đều và lồi, màu vàng nhạt đến vàng đậm, đồng thời làm vàng môi trường xung quanh chính khuẩn lạc này.

Mannitol Salt Phenol-Red Agar (Merck) | 1054040500

Mannitol Salt Phenol-Red Agar là một môi trường nuôi cấy được sử dụng rộng rãi trong vi sinh vật học để phân lập và định danh các vi khuẩn, đặc biệt là các vi khuẩn gây bệnh như Staphylococcus spp.

Thành phần

• Mannitol: Một loại đường có thể phân giải bởi một số vi khuẩn, giúp phân biệt các loài vi khuẩn dựa trên khả năng phân giải mannitol.
• Muối: Giúp tạo ra môi trường có độ ẩm cao, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của vi khuẩn.
• Phenol-Red: Một chất chỉ màu, thay đổi màu từ trắng sang đỏ khi pH của môi trường thay đổi, giúp theo dõi sự phát triển của vi khuẩn qua sự thay đổi màu sắc.

Ứng dụng

1. Phân lập vi khuẩn Staphylococcus: Mannitol Salt Phenol-Red Agar được sử dụng để phân lập và định danh các loài Staphylococcus, đặc biệt là Staphylococcus aureus, do khả năng phân giải mannitol và tạo ra các khu vực đỏ trên đĩa nuôi cấy.
2. Kiểm tra chất lượng thực phẩm: Được sử dụng trong các quy trình kiểm tra chất lượng thực phẩm để phát hiện sự hiện diện của vi khuẩn gây bệnh.
3. Nghiên cứu y học: Thường được sử dụng trong các nghiên cứu y học để phân lập và nghiên cứu các vi khuẩn gây bệnh từ mẫu bệnh phẩm.

Cách sử dụng

1. Chuẩn bị môi trường: Hòa tan các thành phần của Mannitol Salt Phenol-Red Agar trong nước và đem đun sôi để hòa tan hoàn toàn.
2. Khử trùng: Đưa môi trường vào nồi hấp tiệt trùng ở 121°C trong khoảng 15 phút.
3. Đổ môi trường vào đĩa Petri: Sau khi khử trùng, đổ môi trường vào các đĩa Petri và để nguội để môi trường đông đặc lại.
4. Nuôi cấy mẫu: Cấy mẫu vi sinh vật lên bề mặt môi trường và ủ ở nhiệt độ thích hợp.

Ưu điểm

• Phân biệt dễ dàng: Mannitol Salt Phenol-Red Agar giúp phân biệt các loài vi khuẩn dựa trên khả năng phân giải mannitol và sự thay đổi màu sắc.
• Dễ sử dụng: Quy trình chuẩn bị đơn giản và hiệu quả.

Nhược điểm

• Giá thành: Có thể cao hơn so với một số môi trường nuôi cấy khác.
• Yêu cầu bảo quản đặc biệt: Cần được bảo quản ở nơi khô ráo, thoáng mát để duy trì chất lượng.

Quá trình sản xuất

Mannitol Salt Phenol-Red Agar được sản xuất từ các nguyên liệu chất lượng cao, qua quy trình nghiêm ngặt để đảm bảo tính nhất quán và hiệu quả của sản phẩm. Các bước chính trong quá trình sản xuất bao gồm:

1. Lựa chọn nguyên liệu: Sử dụng mannitol, muối và phenol-red có chất lượng cao.
2. Hòa tan và pha trộn: Các thành phần được hòa tan và pha trộn đều để tạo ra môi trường đồng nhất.
3. Khử trùng: Môi trường được đưa vào nồi hấp tiệt trùng ở 121°C trong khoảng 15 phút để đảm bảo vô trùng.

Tính chất hóa học

• Mannitol: Là một loại đường polyol, có khả năng chịu được môi trường muối cao và tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của vi khuẩn phân giải mannitol.
• Muối (NaCl): Nồng độ muối cao (7.5%) giúp ức chế sự phát triển của hầu hết các vi khuẩn không phải Staphylococcus.
• Phenol-Red: Là chất chỉ màu pH, chuyển từ màu đỏ sang màu vàng khi pH giảm do sự phân giải mannitol và sản sinh acid.

Các ứng dụng cụ thể

1. Phân lập Staphylococcus aureus: Mannitol Salt Phenol-Red Agar được sử dụng rộng rãi để phân lập và định danh Staphylococcus aureus từ mẫu bệnh phẩm. S. aureus có khả năng phân giải mannitol, làm thay đổi màu môi trường từ đỏ sang vàng.
2. Phân tích thực phẩm: Sử dụng để kiểm tra sự hiện diện của Staphylococcus trong thực phẩm, đảm bảo an toàn vệ sinh thực phẩm.
3. Kiểm tra môi trường: Được sử dụng trong các quy trình kiểm tra môi trường, đặc biệt là trong các khu vực sản xuất thực phẩm và dược phẩm, để phát hiện sự nhiễm khuẩn Staphylococcus.

Điều kiện bảo quản

• Nhiệt độ: Bảo quản ở nhiệt độ phòng hoặc trong tủ lạnh (4-8°C).
• Độ ẩm: Tránh để môi trường tiếp xúc với độ ẩm cao để tránh bị ẩm mốc hoặc hỏng.
• Đóng gói: Đảm bảo đậy kín nắp sau khi sử dụng để tránh nhiễm khuẩn hoặc tiếp xúc với không khí.

Thí nghiệm mẫu

Dưới đây là một ví dụ về cách sử dụng Mannitol Salt Phenol-Red Agar trong một thí nghiệm cụ thể:

• Mục tiêu: Phân lập và xác định Staphylococcus aureus từ mẫu thực phẩm.
• Phương pháp: Sử dụng Mannitol Salt Phenol-Red Agar để nuôi cấy mẫu thực phẩm, sau đó quan sát sự thay đổi màu sắc và tiến hành các xét nghiệm sinh hóa bổ sung để xác định chính xác loài vi khuẩn.

Ưu điểm và nhược điểm

Ưu điểm:

• Hiệu quả cao: Khả năng phân lập và định danh vi khuẩn Staphylococcus một cách chính xác.
• Dễ sử dụng: Quy trình chuẩn bị và nuôi cấy đơn giản, phù hợp cho nhiều loại mẫu.

Nhược điểm:

• Giá thành: Có thể cao hơn so với một số môi trường nuôi cấy khác.
• Yêu cầu bảo quản đặc biệt: Cần được bảo quản ở nơi khô ráo, thoáng mát để duy trì chất lượng.

So sánh với các môi trường khác

An toàn và quy định

Khi làm việc với Mannitol Salt Phenol-Red Agar, cần tuân thủ các quy định an toàn sinh học để đảm bảo không bị nhiễm khuẩn hoặc tiếp xúc với các tác nhân gây bệnh. Các quy định bao gồm:

• Sử dụng găng tay và kính bảo hộ: Để bảo vệ bản thân khỏi nhiễm khuẩn.
• Làm việc trong điều kiện vô trùng: Để tránh nhiễm khuẩn mẫu và môi trường.
• Xử lý chất thải đúng cách: Để bảo vệ môi trường và ngăn ngừa lây lan vi khuẩn.