Môi trường nuôi cấy OF basal medium (1102820500) được đề xuất bởi Hugh và Leifson (1953) để phát hiện sự oxy hóa và sự giảm sút của carbohydrate lên men. Nó được sử dụng chủ yếu để phân biệt và phân loại vi khuẩn đường ruột gram âm. Một agar chọn lọc và khác biệt cho Pseudomonas cepacia đã được hình thành bởi Welch et al. (1987) trên cơ sở môi trường này, với việc bổ sung agar-agar, lactose, polymyxin B và bacitracin.
Một carbohydrate được thêm vào môi trường nuôi cấy, sự phân hủy carbohydrate thành axit được biểu thị bằng chỉ thị pH bromothymol màu xanh làm thay đổi màu của nó thành màu vàng. Sự suy thoái được phép diễn ra trong khi môi trường được tiếp xúc với không khí (suy thoái có thể oxy hóa hoặc lên men) hoặc dưới loại trừ không khí (suy thoái bằng cách chỉ lên men).
OF Basal Medium (Merck) | 110282
- OF Basal Medium là môi trường cơ bản dùng để xác định khả năng oxy hóa và lên men đường của vi khuẩn Gram âm.
- “acc. to Hugh and Leifson” có nghĩa là môi trường này được chuẩn bị theo phương pháp của Hugh và Leifson, hai nhà khoa học đã phát triển phương pháp này để phân biệt vi khuẩn dựa trên khả năng sử dụng đường.
- Merck | 110282 là mã sản phẩm của OF Basal Medium được cung cấp bởi công ty Merck.
Thành phần:
- Pepton: Cung cấp nguồn nitơ và các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự phát triển của vi khuẩn.
- Beef Extract: Cung cấp các vitamin, khoáng chất và các yếu tố tăng trưởng cho vi khuẩn.
- Sodium Chloride: Duy trì áp suất thẩm thấu và cung cấp ion Na+ cho vi khuẩn.
- Bromthymol Blue: Chất chỉ thị pH, chuyển sang màu vàng khi môi trường bị axit hóa do quá trình lên men đường.
Nguyên lý hoạt động:
-
Xác định khả năng oxy hóa và lên men đường:
- Oxy hóa: Khi vi khuẩn sử dụng đường có mặt oxy, chúng sẽ oxy hóa đường thành CO2 và nước, tạo ra môi trường axit.
- Lên men: Khi vi khuẩn sử dụng đường trong điều kiện thiếu oxy, chúng sẽ lên men đường thành các sản phẩm như acid hữu cơ (ví dụ: acid lactic, acid acetic), khí CO2 và các sản phẩm khác.
-
Cách tiến hành:
- Môi trường được phân chia vào các ống nghiệm.
- Cấy vi khuẩn vào từng ống nghiệm.
- Một số ống nghiệm được phủ một lớp dầu khoáng để tạo điều kiện kỵ khí (thiếu oxy).
- Ủ các ống nghiệm ở nhiệt độ thích hợp.
- Quan sát sự thay đổi màu sắc của môi trường.
-
Kết quả:
- Màu vàng: Chứng tỏ vi khuẩn đã lên men đường (có thể xảy ra cả trong điều kiện hiếu khí và kỵ khí).
- Màu xanh: Chứng tỏ vi khuẩn không lên men đường hoặc chỉ oxy hóa đường trong điều kiện hiếu khí.
Ứng dụng:
- Phân loại vi khuẩn Gram âm: Sử dụng để phân biệt các loài vi khuẩn Gram âm dựa trên khả năng oxy hóa và lên men đường.
- Xác định đặc điểm sinh hóa của vi khuẩn: Giúp xác định các đặc tính sinh hóa của vi khuẩn, hỗ trợ trong việc phân loại và định danh vi khuẩn.
Lưu ý:
- Chuẩn bị môi trường: Tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn của nhà sản xuất để chuẩn bị môi trường.
- Kỹ thuật cấy: Thực hiện kỹ thuật cấy vô trùng để tránh nhiễm khuẩn.
- Kiểm soát chất lượng: Thực hiện kiểm tra chất lượng môi trường bằng cách cấy các chủng vi khuẩn kiểm soát.
Kết luận:
OF Basal Medium là một môi trường cơ bản quan trọng trong vi sinh vật học, được sử dụng để đánh giá khả năng oxy hóa và lên men đường của vi khuẩn Gram âm. Kết quả của xét nghiệm này giúp xác định đặc điểm sinh hóa của vi khuẩn, hỗ trợ trong việc phân loại và định danh vi khuẩn.
Bạn có muốn tìm hiểu thêm về các ứng dụng cụ thể của OF Basal Medium? Hoặc bạn có câu hỏi nào khác về môi trường này?
Các chủ đề gợi ý:
- Các loại đường thường sử dụng trong OF Medium.
- So sánh OF Medium với các phương pháp xác định khả năng sử dụng đường khác.
- Ứng dụng của OF Medium trong các lĩnh vực khác.
Vai trò của các thành phần:
- Pepton và Beef Extract: Cung cấp nguồn nitơ, carbon và các chất dinh dưỡng cần thiết cho sự sinh trưởng của vi khuẩn.
- Sodium Chloride: Duy trì áp suất thẩm thấu và cung cấp ion Na+ cho vi khuẩn.
- Bromthymol Blue: Chất chỉ thị pH nhạy cảm, chuyển từ xanh sang vàng khi môi trường bị axit hóa do quá trình lên men đường.
Các loại đường sử dụng:
- Glucose: Đường đơn giản thường được sử dụng để kiểm tra khả năng lên men của vi khuẩn.
- Lactose: Đường đôi, đặc biệt hữu ích để phân biệt các nhóm vi khuẩn khác nhau dựa trên khả năng lên men lactose.
- Các loại đường khác: Có thể sử dụng các loại đường khác như sucrose, mannitol, để kiểm tra khả năng sử dụng các loại đường này của vi khuẩn.
Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả:
- Độ pH ban đầu: Độ pH của môi trường ban đầu ảnh hưởng đến khả năng chuyển màu của chỉ thị pH.
- Thời gian ủ: Thời gian ủ đủ dài để vi khuẩn có thể phát triển và tạo ra sản phẩm chuyển hóa.
- Nhiệt độ ủ: Nhiệt độ ủ thích hợp cho từng loại vi khuẩn.
- Lượng ôxy: Lớp dầu khoáng giúp tạo điều kiện kỵ khí, nhưng không hoàn toàn loại bỏ được oxy.
Ứng dụng khác:
- Xác định các đặc tính sinh hóa khác: Ngoài khả năng oxy hóa và lên men đường, OF Medium có thể kết hợp với các chất chỉ thị khác để xác định các đặc tính sinh hóa khác của vi khuẩn, như sản xuất H2S, urease.
- Nghiên cứu sinh thái vi sinh vật: Sử dụng để nghiên cứu sự phân bố và đa dạng sinh học của vi khuẩn trong các môi trường khác nhau.
Lưu ý khi sử dụng:
- Kiểm tra chất lượng môi trường: Trước khi sử dụng, cần kiểm tra chất lượng môi trường bằng cách cấy các chủng vi khuẩn kiểm soát.
- Đọc kỹ hướng dẫn sử dụng: Tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn của nhà sản xuất để đảm bảo kết quả chính xác.
- An toàn sinh học: Thực hiện các biện pháp an toàn sinh học khi làm việc với vi khuẩn.
Các câu hỏi thường gặp:
- Tại sao phải sử dụng lớp dầu khoáng? Lớp dầu khoáng tạo ra một lớp màng ngăn cách môi trường với không khí, giúp duy trì điều kiện kỵ khí.
- Làm thế nào để phân biệt giữa oxy hóa và lên men? Nếu chỉ có ống nghiệm không có dầu khoáng chuyển sang màu vàng, chứng tỏ vi khuẩn chỉ oxy hóa đường. Nếu cả hai ống nghiệm đều chuyển sang màu vàng, chứng tỏ vi khuẩn có khả năng cả oxy hóa và lên men đường.
- Có thể sử dụng OF Medium để xác định tất cả các loại vi khuẩn không? OF Medium chủ yếu được sử dụng cho vi khuẩn Gram âm.
Kết luận:
OF Basal Medium là một công cụ hữu ích trong việc phân loại và định danh vi khuẩn Gram âm dựa trên khả năng oxy hóa và lên men đường. Bằng cách hiểu rõ nguyên lý hoạt động và các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả, chúng ta có thể sử dụng môi trường này một cách hiệu quả trong nghiên cứu vi sinh vật.
Bạn có muốn tìm hiểu thêm về các ứng dụng cụ thể của OF Basal Medium trong một lĩnh vực nào đó không? Hoặc bạn có câu hỏi nào khác về môi trường này?
Các chủ đề gợi ý:
- So sánh OF Medium với các phương pháp xác định khả năng sử dụng đường khác như TSI Agar.
- Ứng dụng của OF Medium trong kiểm soát chất lượng thực phẩm.
- Các loại vi khuẩn thường được xác định bằng OF Medium.